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液相譜圖出現(xiàn)裂峰怎么辦?

2023-02-17

在樣品檢測中,經(jīng)常會出現(xiàn)一個純度較高的單成分對照品,進樣后卻出現(xiàn)分裂峰,甚至直接呈兩個峰的狀態(tài)。除了色譜柱被污染,色譜柱損壞等原因外,還有可能是檢測方法不當,比如pH值不合適,離子試劑濃度不當?shù)仍颉?/p>

實例一(離子對試劑濃度不當):

離子對試劑與化合物結合后使保留時間得以延長,但如果離子對試劑的使用量不當,化合物與離子對結合不完整,導致待測成分部分結合,也會呈現(xiàn)兩種狀態(tài),導致峰分裂。

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色譜柱:Ultimate? LP-C18 4.6×300mm,5μm

流動相:1g/L庚烷磺酸鈉(pH2.0):甲醇=90:10

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流動相:2g/L庚烷磺酸鈉(pH2.0):甲醇=80:20

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結論:離子對作為比較特殊的分離模式,其間往往作用力是多方作用,增加離子對能夠是兩個改善峰形,改善分裂峰,同時也可能需要微調其他條件來輔助。

實例二(pH值不當):

酸堿性化合物在不同pH下呈現(xiàn)不同的狀態(tài),不合適的pH條件下化合物出現(xiàn)分子態(tài)和離子態(tài)共同存在的情況,導致峰分裂甚至直接呈兩個峰。

微信截圖_20230217132227.png

色譜柱:Ultimate? LP-C18 4.6×250mm,5μm

流動相:10mmol/L磷酸二氫鉀:甲醇=80:20

微信截圖_20230217132236.png

結論:調整流動相的pH后,使化合物在特定環(huán)境中保持穩(wěn)定且單一的狀態(tài),從而不呈現(xiàn)分裂峰。

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